9月7日，因結(jié)腸癌去世的漫威電影《黑豹》主演查德維克·博斯曼的追悼會在美國洛杉磯舉行；因鼻咽癌去世的《新警察故事》導(dǎo)演陳木勝的追思會在9月4日晚舉行……近來，多位知名人士的早逝讓人感到惋惜痛心，同時(shí)也帶來很多思考。

隨著腫瘤治療手段的進(jìn)步，很多腫瘤的5年生存率已非常高，其中就包括結(jié)腸癌和鼻咽癌。但值得注意的是，博斯曼和陳木勝在查出腫瘤的時(shí)候，都已屬中晚期。時(shí)至今日，腫瘤仍然以早期發(fā)現(xiàn)、早期進(jìn)行手術(shù)切除或藥物治療最為有效。

為此，腫瘤的早期篩查顯得尤為重要。“腫瘤標(biāo)志物檢查作為一種簡便易行且對人體傷害較小的方法，自1846年本-周蛋白被發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用于多發(fā)性骨髓瘤的診斷和治療以來，眾多后續(xù)發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物被廣泛應(yīng)用于腫瘤的篩查、診斷、預(yù)后評估、療效監(jiān)測、復(fù)發(fā)預(yù)測等環(huán)節(jié)。”南開大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院教授張曉東表示，雖然目前腫瘤標(biāo)志物檢查的敏感性、特異性及穩(wěn)定性還做不到那么完美，但它的確是輔助臨床的“好幫手”。

更多新物質(zhì)加入腫瘤標(biāo)志物“大家庭”

腫瘤標(biāo)志物是在腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或由機(jī)體對腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的標(biāo)志腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)。它可以客觀地、特異性地反映腫瘤的發(fā)生和發(fā)展進(jìn)程。在人體的血液、體液、組織或細(xì)胞中都可檢測到。

“目前已經(jīng)命名的腫瘤標(biāo)志物達(dá)100多種。”張曉東介紹，臨床上比較常用的有肝癌腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白AFP，肺癌腫瘤標(biāo)志物CA211、NSE，消化道腫瘤標(biāo)志物CA199、CA242，胃癌腫瘤標(biāo)志物CA724，女性腫瘤標(biāo)志物CA125，男性腫瘤標(biāo)志物PSA、PAP等。

“這100多種標(biāo)志物又分為胚胎抗原、糖類蛋白、腫瘤相關(guān)酶、激素、細(xì)胞角蛋白等幾大類。像CA開頭的都屬于糖類抗原，PSA、NSE屬于腫瘤相關(guān)酶，AFP則屬于胚胎性抗原。”張曉東說，近幾年一些新標(biāo)志物也進(jìn)入科學(xué)家們的研究范疇。microRNA甲基化、環(huán)狀RNA（circRNA）、表觀遺傳分子等都是目前學(xué)術(shù)界比較前沿的腫瘤標(biāo)志物。

microRNA是一種由21—22個(gè)核苷酸組成的非編碼小RNA，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)它在癌組織中異常表達(dá)，并且能在體液中穩(wěn)定存在，可作為癌癥的有效生物標(biāo)記。

環(huán)狀RNA是具有閉合環(huán)狀的特殊結(jié)構(gòu)的非編碼RNA分子，研究人員發(fā)現(xiàn)，不同類型的癌組織具有不同的環(huán)狀RNA的表達(dá)譜, 同一環(huán)狀RNA在不同類型的癌組織中的表達(dá)情況也不盡相同。“目前研究較多的是ciRS-7(CDR1as), ciRS-7在肝癌、宮頸癌和惡性膠質(zhì)瘤的癌組織中都存在差異性表達(dá)。cir-ITCH與食管癌、結(jié)直腸癌和肺癌也有著密切關(guān)系。”張曉東說。

此外還有使用表觀遺傳分子作為腫瘤標(biāo)志物，如DNA甲基化。對此張曉東解釋，DNA甲基化會在多種類型癌癥中頻繁發(fā)生，趨于關(guān)閉多種抑癌基因的表達(dá)。通過檢測DNA甲基化的變化，可推測出患癌的概率高低。而且對于臨床診斷，DNA標(biāo)志物比RNA標(biāo)志物更可靠、更穩(wěn)定。

“雖然這些新的腫瘤標(biāo)志物也存在各自的‘短板’，但它們的出現(xiàn)，拓展了腫瘤標(biāo)志物的檢測種類。”張曉東認(rèn)為，未來多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測，將能提高檢測的靈敏性，幫臨床醫(yī)生更早診斷出癌癥。

多項(xiàng)技術(shù)為腫瘤精準(zhǔn)檢測保駕護(hù)航

“腫瘤標(biāo)志物的準(zhǔn)確檢出，離不開檢測技術(shù)的發(fā)展，目前已有多項(xiàng)生物技術(shù)應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物的檢測。”張曉東介紹，這包括化學(xué)發(fā)光免疫分析、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫傳感器、蛋白組學(xué)、液體活檢、分子生物學(xué)方法等。

“其中化學(xué)發(fā)光免疫分析是目前臨床常

用和較為成熟的腫瘤標(biāo)志物檢測技術(shù)，其利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)作為標(biāo)記物，根據(jù)發(fā)光信號的強(qiáng)度來判斷待測物質(zhì)的量。隨著技術(shù)發(fā)展，將電化學(xué)技術(shù)和化學(xué)發(fā)光相結(jié)合檢測腫瘤標(biāo)志物，可提高檢測的特異性和準(zhǔn)確性。”張曉東說。

除此之外，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)也是一項(xiàng)臨床上已普及的檢測技術(shù)。這一技術(shù)將抗原或抗體包被于固相支持物上，將酶標(biāo)抗原或抗體加入抗原抗體復(fù)合物中，通過底物使酶顯色來達(dá)到檢測目的。“不同的研究人員會采用不同的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)策略，如使用單克隆或多克隆抗體及嵌合抗體來開發(fā)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒。”張曉東介紹，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)不僅適用于對單一分析物的測定，在多個(gè)分析物同時(shí)存在時(shí)，同樣具有良好的適用性。

“除了以上這兩種臨床上常用的檢測技術(shù)，免疫傳感器一直備受腫瘤研究者關(guān)注和青睞。”張曉東解釋，將特異性免疫反應(yīng)與生物傳感技術(shù)相結(jié)合形成的生物傳感器，其生物識別部分來自抗原與抗體的特異性識別和結(jié)合作用，通過理化換能器和信號放大裝置將生物信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栍糜跈z測。不過目前免疫傳感器大部分處于試驗(yàn)階段，隨著技術(shù)不斷成熟，有望用于檢測腫瘤標(biāo)志物。

蛋白組學(xué)也在近年興起，這種檢測技術(shù)以蛋白質(zhì)為核心，對蛋白質(zhì)的表達(dá)模式和功能模式進(jìn)行研究。蛋白組學(xué)技術(shù)具有高通量、微型化、自動(dòng)化的優(yōu)勢，為腫瘤標(biāo)志物的研究提供了良好的平臺。“不過這種技術(shù)檢測成本昂貴、對技術(shù)人員操作要求高，所以目前也沒被應(yīng)用于臨床。”張曉東說。

腫瘤早篩研發(fā)目標(biāo)——敏感、特異、穩(wěn)定

“腫瘤標(biāo)志物的檢測對于早期發(fā)現(xiàn)無癥狀微灶腫瘤、預(yù)測預(yù)后、療效評價(jià)等具有重要意義。”張曉東介紹，X射線、超聲波或者CT等傳統(tǒng)的影像學(xué)檢查，當(dāng)腫瘤直徑小于1厘米時(shí)，很難被發(fā)現(xiàn)。但如果進(jìn)行血清腫瘤標(biāo)志物檢測，在腫瘤僅1微克大小時(shí)，就可以敏感地檢測到相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，所以它比影像學(xué)檢查能更早檢測到腫瘤。

“當(dāng)發(fā)現(xiàn)某種標(biāo)志物升高，可以進(jìn)一步進(jìn)行多種標(biāo)志物的聯(lián)合檢查。而后再反過來通過更高級別的影像學(xué)檢查有的放矢地進(jìn)行排查，不讓早期腫瘤成為‘漏網(wǎng)之魚’。”張曉東說。

腫瘤標(biāo)志物檢測，對于腫瘤的鑒別診斷和分期也非常有意義。腫瘤標(biāo)志物常用于鑒別腫瘤是良性還是惡性。由于血清的腫瘤標(biāo)志物升高水平和腫瘤大小及惡性程度有關(guān)，定量的檢測可以有助于臨床分期和鑒別診斷。

此外，對腫瘤的預(yù)后判斷、療效監(jiān)測，檢測腫瘤標(biāo)志物也非常有意義。“大部分的腫瘤標(biāo)志物的檢測值和腫瘤治療的效果是相關(guān)的，比如手術(shù)后，腫瘤標(biāo)志物的檢測值會明顯下降。”張曉東介紹，腫瘤標(biāo)志物水平還可以作為腫瘤是否復(fù)發(fā)的指標(biāo)。比如乳腺癌、結(jié)腸癌，在初診的時(shí)候腫瘤標(biāo)志物水平可能并不一定很高，但是在腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)會升高。

雖然腫瘤標(biāo)志物的作用毋庸置疑，但目前為止還沒有哪一種腫瘤標(biāo)志物的準(zhǔn)確率能達(dá)到100%。一種腫瘤標(biāo)志物可能與多種腫瘤相關(guān)，可在良性的腫瘤或胚胎組織中存在，也會在身體出現(xiàn)炎癥時(shí)升高，甚至正常組織中也存在。由于腫瘤標(biāo)志物不是100%的特異和敏感，因此檢查結(jié)果會出現(xiàn)假陽性或假陰性。此外，任何化驗(yàn)都存在一定的誤差，而且檢測機(jī)器、檢測方法和檢測所使用的試劑都可能不同，這會帶來一定的誤差，甚至也有誤診的可能性。

張曉東表示，不管使用何種材料，使用何種方法，提高檢測的敏感性、特異性及穩(wěn)定性永遠(yuǎn)是腫瘤標(biāo)志物研發(fā)所追求的目標(biāo)。這需要發(fā)現(xiàn)大量靈敏度或特異性更高的標(biāo)志物，同時(shí)在檢測方法上也要緊跟臨床需求不斷發(fā)展。

目前不同檢測方法均有其優(yōu)勢與不足，如何對不同方法進(jìn)行整合，提高腫瘤標(biāo)志物的檢測能力，是研究者們需關(guān)注和探索的問題。此外，在腫瘤早期檢出低含量腫瘤標(biāo)志物，永遠(yuǎn)是臨床腫瘤診斷的追求。

“如果未來檢查腫瘤標(biāo)志物更方便，在家就能檢測出明確的結(jié)果，那么腫瘤的早發(fā)現(xiàn)，以及腫瘤治療后防止復(fù)發(fā)將成為可能。”張曉東表示，雖然目前還有很多難題需要解決，但是科研人員一直在朝著這個(gè)方向努力，相信未來一定會有這樣的技術(shù)、產(chǎn)品問世。